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Psp GBD (exo-) DNA聚合酶(deep vent exo-)

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有效期至: 长期有效
最后更新: 2017-07-08 12:02
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“Psp GBD (exo-) DNA聚合酶(deep vent exo-)”参数说明

类别: 分子生物学工具酶 延伸速率: 1kb/min
半衰期: 95℃,23h 扩增片段长度: 6kb
用途1: 高保真 用途3: 复杂模板(富含gc)
保真度vstaq: 用途2: 常规PCR

“Psp GBD (exo-) DNA聚合酶(deep vent exo-)”详细介绍

概述:
Psp GBD (exo-) DNA聚合酶 (也被称为Deep Vent (exo-) DNA聚合酶) 是利用基因工程技术去除了Psp GBD DNA聚合酶的3′→5′核酸外切酶校读活性而得到的。Psp GBD (exo-) DNA聚合酶在95°C时的半衰期是23小时,在100°C时半衰期是8小时。Psp GBD (exo-) DNA聚合酶和Tli (exo-) DNA聚合酶都适用于引物延伸和高温 (72°C)测序。
来源:
Psp GBD (exo-) DNA聚合酶纯化自重组E. coli菌株,该菌株携带有Psp GBD DNA聚合酶 (D141A / E143A) 基因(1)。
应用:
1. 引物延伸。
2. PCR。
反应条件:
100 μl反应体系含:1× Psp GBD (exo-) DNA聚合酶反应缓冲液 [20 mM Tris-HCl (pH 8.8 @ 25°C),10 mM (NH4)2SO4,10 mM KCl,2 mM MgSO4,0.1% Triton X-100 (V/V)],MgSO4 (补加或不补加),DNA模板,引物,dNTPs和2-4 U聚合酶。
质量检测:
核酸外切酶活性:50 μl反应体系中,20 U本酶与1 μg的Hind III消化的λDNA于37°C温育4小时,电泳条带无明显变化。
核酸内切酶活性:50 μl反应体系中,20 U本酶与1 μg的pUC19质粒于37°C温育4小时,电泳条带无明显变化。
纯度:经SDS-PAGE (考马斯亮蓝染色) 检测其纯度大于95%。
质保声明:
Psp GBD (exo-) DNA聚合酶经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。
单位定义:
1单位指75°C条件下反应30分钟,能使10 nmol的dNTPs掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量。
参考文献:
1. Jannasch, H.W. et al. (1992), Appl. Environ. Microbiol., 58, 3472-3481.

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